香连素片质量标准研究论文_论文精选_好文学网,三仙壮骨胶囊提取工艺研究_论文精选_好文学网

 现代文学     |      2019-11-22 18:27

三仙壮骨胶囊提取工艺研究

香连素片质量标准研究论文

时间:2016-08-29 15:20点击: 次来源:网络作者:admin评论:- 小 + 大

时间:2016-08-29 10:21点击: 次来源:好文学作者:编辑评论:- 小 + 大

有关续断等药材成分提取的研究报道很多,综合文献研究和预试验,采用水煎煮方式进行提取,并以川续断皂苷VI含量作为考察工艺的指标,这是一篇三仙壮骨胶囊提取工艺,详细内容点击查看全文。

香连素片是广东万年青制药有限公司的产品,具有清热燥湿、行气止痛的功效,临床用于湿热型痢疾、里急后重、腹痛泄泻。本文是一篇香连素片质量标准研究,让我们一起来看看具体内容吧!

目的 优选三仙壮骨胶囊水提部位的佳提取工艺。方法 采用高效液相色谱法测定川续断皂苷VI的含量,并以川续断皂苷VI的含量作为指标,采用正交设计试验考察三仙壮骨胶囊的佳提取工艺。结果 佳提取工艺为:加10倍量的水煎煮2次,每次1 h。结论 该提取方法合理、可行,为生产提供了实验依据。

目的 建立香连素片的质量控制标准。方法 采用薄层色谱法鉴别香连素片中的木香;采用高效液相色谱法测定香连素片中盐酸小檗碱的含量。结果 在薄层色谱中检出了木香;盐酸小檗碱的进样量在0.0378~0.378 μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为101.49%,RSD为1.97%。结论 本方法专属性强、准确、重现性好,可作为香连素片的质量控制标准。

三仙壮骨胶囊;提取工艺;高效液相色谱法;川续断皂苷VI

香连素片;木香;薄层色谱法;盐酸小檗碱;高效液相色谱法

Abstract:Objective To optimize the extraction procedure of water瞫oluble components in Sanxianzhuanggu capsules. Methods Orthogonal design was used in the experiment and the content of asperosaponin VI was determined by HPLC. Results The ideal extraction process was: 2 times of extraction, 10 times of water, 1 hour of reflux. Conclusion The optimized extraction procedure is rational and feasible for the industry manufacture of the capsules.

Abstract:Objective To establish a method for quality control of Xiangliansu tablets. Methods Radix Auckiandiae in the tablets was identified by TLC. The content of berberine hydrochloride in the tablets was determined by HPLC. Results Radix Auckiandiae could be identified by TLC. Berberine hydrochloride showed a good linear correlation over the range of 0.0378-0.378 μg . The average recovery of berberine hydrochloride was 101.49% with RSD 1.97% . Conclutions The method is specific, accurate and reproducible for the equality control of Xiangliansu tablets.

Key words:Sanxianzhuangu capsules; extraction procedure; HPLC; asperosaponin VI

Key words:Xiangliansu tablets;berberine hydrochloride;HPLC;Radix auckiandiae;TLC

三仙壮骨胶囊是由续断、淫羊藿、独一味、当归等几味中药组成,本品为研制者常年行医的经验方,临床用于治疗跌打损伤、筋骨扭伤、瘀积肿痛。方中续断、淫羊藿、独一味主要含有皂苷类成分及黄酮苷类成分,在水中溶解性较好,故此三味药材采用水煎煮方式提取。本研究采用正交设计法,以川续断皂苷VI为指标,用高效液相色谱法测定其含量[1-4],以优选三仙壮骨胶囊水提部位的佳工艺。

香连素片是广东万年青制药有限公司的产品,具有清热燥湿、行气止痛的功效,临床用于湿热型痢疾、里急后重、腹痛泄泻。其处方为木香500 g、盐酸小檗碱75 g。原药品标准[1]鉴别木香用试管反应,盐酸小檗碱的含量用紫外分光光度法测定,方法专属性较低且影响因素多。本文采用薄层色谱法鉴别木香、高效液相色谱法测定盐酸小檗碱的含量,结果表明操作简便、准确、重复性好,为该品种的质量标准进一步修订提供了依据。

1 材料与试剂

1 仪器与试药

Waters 2695高效液相色谱仪,Waters 2996 PDA检测器, Empowers色谱工作站, Diamonsil C18柱(5 μm,250 mm×4.6 mm,迪马公司)。KQ100型超声波清洗器; BSZZ4S型电子分析天平。

香连素片(批号:030801、030802、030803、040701、041002、050601、050802、060601、060602、060603)均为广东万年青制药有限公司产品;木香对照药材及盐酸小檗碱对照品均购自中国药品生物制品检验所;硅胶G预制板及硅胶G均由青岛海洋化工厂生产;乙腈为色谱纯;其他试剂与试药均为分析纯。

川续断皂苷VI对照品(中国药品生物制品检定所,批号:111685200401);乙腈为色谱纯;水为屈臣氏蒸馏水;其他试剂均为分析纯。

LC2010A高效液相色谱仪, UV2501PC紫外分光光度仪, CQ15A超声波清洗器。

2 方法与结果

2 薄层鉴别[2]

按处方称取续断、淫羊藿、独一味药材,加水进行煎煮,在煎煮过程中,采用L9表安排正交试验,以续断中川续断皂苷Ⅵ的含量为指标,对提取效果影响较大的加水量、煎煮次数及煎煮时间3个因素进行考察,各因素水平见表1。表1 因素水平表

取本品2片,研成细粉,加三氯甲烷10 mL,超声处理30 min,滤过,滤液浓缩至2 mL,作为供试品溶液。另取木香对照药材0.2 g、不含木香的阴性样品,同法分别制成对照药材溶液及阴性对照溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述3种溶液各3 μL,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以三氯甲烷不芳和为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%香草醛硫酸溶液,在105 ℃加热至斑点清晰。置可见光下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性对照无干扰,见图1。

2.2 川续断皂苷VI含量测定

3 含量测定

2.2.1 色谱条件 色谱柱为Diamonsil C18柱(5 μm,250 mm×4.6 mm);流动相为乙腈菜;检测波长为210 nm;柱温为25 ℃;流速为1 mL/min;进样量为10 μL。

色谱柱:phenomenex C18(150 mm×4.6 mm,5 μm) 流动相:以磷酸盐缓冲溶液[0.05 mol/L磷酸二氢钾和0.01 mol/L十二烷基磺酸钠,含0.2%三乙胺]惨译,用磷酸调节pH值至3.0为流动相;流速:1.2 mL/min,检测波长:266 nm,柱温:室温,进样量:10 μL,理论塔板数不低于1500。

2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取川续断皂苷VI对照品3.09 mg,置2 mL容量瓶中,用甲醇溶解配制成质量浓度为1.545 mg/mL的对照品溶液。

3.2.1 对照品溶液的制备

2.2.3 供试品液的制备 取水提取液适量,置圆底烧瓶中,减压浓缩至干,精密加入甲醇25 mL,称定重量,超声提取30 min,放冷,用甲醇补足重量,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。

取盐酸小檗碱对照品适量,精密称定,加乙醇制成每1 mL含120 μg的溶液,作为对照品溶液。

2.2.4 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液2、4、8、12、16、20 μL,依次注入高效液相色谱仪,各重复3次,记录峰面积。以川续断皂苷VI峰面积均值进行线性回归,得回归方程为A=191595.75ρ97704.96,r=0.999 8。表明川续断皂苷VI在3.09~30.9 μg/mL之间与峰面积具有良好线性关系。

3.2.2 供试品溶液的制备

2.2.5 样品含量测定 精密吸取供试品溶液及对照品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按“2.2.1”项下条件进行测定,测得的川续断皂苷Ⅵ对照品和样品色谱图见图1。

取本品20片,精密称定,研细,精密称取适量,置索氏提取器中,加盐酸布状适量,加热回流提取至提取液无色,将提取液移至50 mL量瓶中,用少量盐酸布状的混合液洗涤容器,洗液并入提取液中,并稀释至刻度,摇匀,精密量取1 mL,置10 mL量瓶中,加乙醇至刻度,摇匀,即得。

2.2.6 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液 10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件进行测定,连续测定6次,结果RSD值为0.66%,表明本法精密度良好。

3.2.3 阴性对照溶液的制备

2.2.7 重复性试验 分别取同一批号样品6份,按“2.2.3”项方法制备溶液,依法测定川续断皂苷Ⅵ的含量,结果测得含量的RSD值为0.92%,表明本法重复性良好。

按照本品的处方、制法制备缺少盐酸小檗碱的模拟样品,按“3.2.2”项方法制成阴性对照溶液。

2.2.8 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件,间隔不同时间进行测定,结果RSD值为0.50%,表明供试品溶液在4 h内测定基本稳定。

分别取供试品溶液、对照品溶液及阴性对照溶液,按上述色谱条件测定,结果阴性对照对盐酸小檗碱测定无干扰,说明方法专属性强。结果见图2。

2.2.9 加样回收率试验 取已知含量的样品,分别加入一定量的对照品,置圆底烧瓶中,按“2.2.3”项方法制备供试品溶液并在上述条件下测定,其平均回收率为100.30%,RSD为2.84%。

3.4 线性关系的考察

  1. 3 正交实验结果

精密称取盐酸小檗碱对照品适量,用乙醇溶解制成质量浓度为37.8 μg/mL的溶液,分别精密吸取1、2、4、6、8、10 μL注入液相色谱仪中,按上述色谱条件测定色谱峰面积,以进样量为纵坐标,绘制标准曲线,经线性回归,得线性回归方程为Y=2.88725×106m-5586.84,r=0.999 7,表明盐酸小檗碱进样量在0.0378~0.378 μg范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系。

结果见表2、表3。表2 正交试验结果表3 方差分析表从表2、表3中可见,因素A、因素C对实验结果有显着影响,因素B对实验结果影响较小。综合正交实验结果及节约生产成本的角度考虑,确定佳工艺为A3B2C2,即加10倍量水煎煮2次,每次1 h。按佳工艺对3批样品进行验证实验,结果3批样品的平均含量分别为11.57、12.19和12.02 mg/粒,可见该工艺稳定可行。

精密吸取同一批供试品溶液各10 μL,按上述色谱条件,每隔1 h测1次峰面积,结果表明盐酸小檗碱在24 h内稳定,RSD为0.66%。